Wat is het optimale centrifugatieprotocol voor het bereiden van PRP?
Wat is PRP?
Dit is natuurlijk de eerste en belangrijkste vraag, want voor we dit beantwoorden, kunnen we niet naar de hoofdvraag. PRP staat voor ‘Platelet Rich Plasma’. Het is niks meer of minder dan het gebruik maken van een deel van je eigen bloed.
PRP bevat bloedplaatjes die helpen bij het stollingsproces van je bloed en daarnaast ook groeihormonen. We gebruiken PRP voor het stimuleren van haargroei, weefselgenezing, osteoartritis en bij schade aan ligamenten en pezen.
We nemen dus maar een deel van je bloed, de plasma deel. De concentratie aan bloedplaatjes is dan ook 5x zo hoog in de plasma dan in je hele bloed. In je hele bloed zitten ongeveer 200 000 bloedplaatjes/ µL en in plasma 1000 000 bloedplaatjes/ µL.
Het proces van PRP voorbereiding:
Stap 1: Kies eerst je centrifuge apparaat
Stap 2: bloedafname in een buisje met daarin antistollingsmiddel.
Stap 3: Centrifugeren
Stap 4: Bewaren en temperatuur
Stap 5: Toedienen van de PRP
Dit is natuurlijk een hele basic uitleg over het proces. Maar hieronder leg ik jullie graag uit over alle beste stappen die je kunt gebruiken voor het beste resultaat. Waarom moet je alle stappen goed doorlopen? Om ervoor te zorgen dat je zoveel mogelijk bloedplaatjes en hormonen hebt gekregen in je buis.
Stap 1: Kies je centrifuge apparaat
Er zijn twee verschillende rotaties en dus twee verschillende centrifuge apparaten. Zo hebben we de ‘swing out-horizontale’ rotator en de fixed angled (hoek) rotator. De ‘swing out-horizontale’ rotator is superieur aan de vaste hoek rotator apparaat. De swing out zorgt voor minder celtrauma en minder schade aan de plasma componenten dan de vaste hoek rotator. Dit resulteert natuurlijk in een kwalitatief betere PRP.
Stap 2: Bloedafname
Het begint eigenlijk al bij stap 1 om het beste resultaat aan PRP te verkrijgen, maar stap 2 is ook zeker niet onbelangrijk.De bloedplaatjes kunnen redelijk snel kapot gaan bij de bloedafname. Dus een dunne naald waar de bloed doorheen stroomt, kan al een factor zijn waardoor de bloedplaatjes onderweg door de naald kapot kunnen gaan. Een dikkere naald is beter als het gaat om het behouden van intacte bloedplaatjes. Daarna moeten we niet vergeten de tourniquet tijdig los te halen wanneer we zien dat ons buisje wordt gevuld. Heb je je tourniquet te strak of te lang om de arm bij het vullen van je buisjes? Dan kan dit alweer zorgen voor kapotte bloedplaatjes.
Keuze van je buisje
Er zijn soorten buisjes voor bloedafname. Je hebt in ieder geval een buisje nodig waar een anticoagulant in zit. Een leeg buisje zonder een anticoagulant maakt geen PRP, maar een PRF. Wees er dus eerst zeker van dat je een anticoagulant in je buisje hebt. De vraag is daarna welke anticoagulant je het beste kan gebruiken. Verschillende anticoagulantia kunnen verschillend impact hebben op de bloedplaatjes en hormonen in het bloed. Het beste is om een ACD-A bevattende buisje te gebruiken voor een kwalitatief goed PRP met de hoogste bloedplaatjes, activatie en morfologie. Een buisje met EDTA of natrium citraat daarentegen is niet aan te raden. Alhoewel, de hormonen variëren niet veel in een EDTA, ACD-A of natrium citraat buis. De mesenchymale stamcellen variëren ook niet veel tussen een ACD-A of natrium citraat buis, maar bloedplaatjes dus wel. Kies dus altijd voor een ACD-A buis bij bloedafname voor de hoogste bloedplaatjes.
Stap 3: Centrifugeren
Single of dubbel centrifugeren?
Ze hebben beide hun voor en nadelen. In het algemeen geeft een dubbele centrifugatie geconcentreerdere bloedplaatjes dan een single. Een single daarentegen geeft hogere concentraties aan leukocyten en dus ook hogere concentraties aan HGF, IGF-1, and PDGF-AB hormonen. Let wel, als je een PPP (Platelet Poor Plasma) krijgt en dit toedient bij je patiënt, kan dit een averechtse werking hebben. Je patiënt kan hiermee juist haaruitval zien!
Centrifugale kracht en duur
Single Centrifugatie
Wanneer je kiest voor single centrifugeren, kan je het beste kiezen voor een centrifugale kracht tussen 70-100 G en een duur van 10 minuten. De centrifugale kracht (G) hangt af van verschillende factoren en is dus verschillend per centrifuge apparaat.
Je kan een online calculator gebruiken voor het berekenen van de RPM voor jouw centrifuge apparaat. Zo kan je bijvoorbeeld een tabel gebruiken voor het bepalen van de RPM die je moet instellen voor jouw apparaat.
Dubbel centrifugatie
Als je kiest voor dubbel centrifugeren, kan je kiezen voor een G force tussen de 100-160 voor de eerste ronde en 250-400 G voor de tweede ronde. De eerste ronde duurt meestal 10 minuten en de tweede rond de 15 minuten. Hiermee krijg je dus het grootste aantal bloedplaatjes.
Stap 4: Bewaren en temperatuur
Je kan en mag na de voorbereiding van de PRP, de PRP bewaren voor maximaal 8 uur. Na 8 uur verlies je de leukocyten en na 24 uur beschadig je de bloedplaatjes en de activatie daarvan. Je kan het gewoon op kamer temperatuur bewaren. Is jouw doel het gebruiken van de bloedplaatjes alleen? Dan kan je dus tot 24 uur bewaren.
Temperatuur
Door de rotatie van de gevulde buisjes in de centrifuge apparaat, kan de temperatuur oplopen. Kijk dus uit wat voor apparaat je hebt en of deze door frictie de temperatuur laat oplopen. Er wordt een temperatuur tussen 20-24 graden celcius aangehouden. Laatste tijd laten studies wel zien dat een temperatuur tussen 12-16 graden celcius het beste is voor de levensvatbaarheid en herstel van de bloedplaatjes. Ik zou mede daarom kiezen voor een apparaat die de bloedplaatjes tussen 12 en 16 graden celcius kan houden.
Toedienen van de PRP
Je hebt de PRP correct voorbereid en wil de PRP toedienen. De ene kiest ervoor om de PRP te smeren op de huid en daar met de microneedle overheen te gaan, en de ander spuit het direct in de huid met de naald.
Microneedle kan dan wel goed zijn voor de huid, maar de PRP komt niet zo makkelijk de huid binnen na microneedling. Het kan ook zo zijn dat je een overgrote deel verspilt en maar een deel binnenkomt. Je kan beter de PRP direct in de huid of de hoofdhuid spuiten om het effect van de PRP zelf te zien. Als je wil kan je altijd nog daarna microneedlen.
Conclusie
Zo, dat was het. Je kent nu de stappen en waar je op moet letten als je je wil laten behandelen door een arts of deze behandeling wil uitvoeren bij je patient. Let wel, houdt jezelf altijd up to date, want wetenschap is onderworpen aan veranderingen. Voor je het weet is dit alweer oud nieuws en moet je bepaalde dingen aanpassen.
Bronnen
[1] Marx, R. E. (2004). Platelet-rich plasma: evidence to support its use. Journal of Oral and Maxillofacial Surgery, 62(4), 489-496. CrossRef Full Text
[2] Singh, S. (2018). Comparative (quantitative and qualitative) analysis of three different reagents for preparation of platelet-rich plasma for hair rejuvenation. Journal of Cutaneous and Aesthetic Surgery, 11(3), 127. CrossRef Full Text
[3] do Amaral, R. J. F. C., da Silva, N. P., Haddad, N. F., Lopes, L. S., Ferreira, F. D., Cappelletti, P. A., … & Balduino, A. (2016). Platelet-rich plasma obtained with different anticoagulants and their effect on platelet numbers and mesenchymal stromal cells behavior in vitro. Stem Cells International, 2016, Article ID 7414036. CrossRef Full Text
[4] Arora, G., & Arora, S. (2021). Platelet‐rich plasma—Where do we stand today? A critical narrative review and analysis. Dermatologic Therapy, 34(1), e14343. CrossRef Full Text
[5] Cohn, C. S., Delaney, M., Johnson, S. T., & Katz, L. M. (Eds.) (2020). Technical manual, 20th edition. AABB. Buy it here or read the PRP preparation method 6-12 here.
[6] Dhurat, R., & Sukesh, M. S. (2014). Principles and methods of preparation of platelet-rich plasma: a review and author’s perspective. Journal of Cutaneous and Aesthetic Surgery, 7(4), 189. CrossRef Full Text
[7] Pachito, D. V., Bagattini, Â. M., de Almeida, A. M., Mendrone-Júnior, A., & Riera, R. (2020). Technical procedures for preparation and administration of platelet-rich plasma and related products: a scoping review. Frontiers in Cell and Developmental Biology, 8, 1556. CrossRef Full Text
[8] Mazzocca, A. D., McCarthy, M. B. R., Chowaniec, D. M., Cote, M. P., Romeo, A. A., Bradley, J. P., … & Beitzel, K. (2012). Platelet-rich plasma differs according to preparation method and human variability. JBJS, 94(4), 308-316. CrossRef Full Text
[9] Tamimi, F. M., Montalvo, S., Tresguerres, I., & Jerez, L. B. (2007). A comparative study of 2 methods for obtaining platelet-rich plasma. Journal of Oral and Maxillofacial Surgery, 65(6), 1084-1093. CrossRef Full Text
[10] Perez, A. G., Lana, J. F. S., Rodrigues, A. A., Luzo, A. C. M., Belangero, W. D., & Santana, M. H. A. (2014). Relevant aspects of centrifugation step in the preparation of platelet-rich plasma. International Scholarly Research Notices, 2014. CrossRef Full Text
[11] Yin, W., Xu, H., Sheng, J., Zhu, Z., Jin, D., Hsu, P., … & Zhang, C. (2017). Optimization of pure platelet‑rich plasma preparation: A comparative study of pure platelet‑rich plasma obtained using different centrifugal conditions in a single‑donor model. Experimental and Therapeutic Medicine, 14(3), 2060-2070. CrossRef Full Text
[12] Abu Kasim, H., & Al-Hassan, F. (2016). Assessment of platelet concentrate prepared from fresh and overnight held whole blood. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research, 9, 16–20. CrossRef Full Text
